影响ELISA试剂盒测定结果有的原因

　　影响ELISA试剂盒测定结果有的原因
　　很多时候客户在订购ELISA试剂盒时会问到一些问题，影响ELISA试剂盒测定结果有哪些原因呢？让我与您一起来讨论：
　　ELISA试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定，具有灵敏度高，操作简单等优点，但是在具体实验过程中影响因素较多，并且要按照严格的说明要求，在临床检验中除正常反应外，有时?？杉揭恍┐砦蠼峁醇傺粜曰蚣僖跣越峁?br />　　影响ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。本文就标本因素对ELISA测定的影响做如下讨论。
　?。?）类风湿因子
　　人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性。ELISA试剂盒解决该情况的办法是：①用F（ab）2替代完整的IgG；②标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中，使RF降解。
　?。?）补体
　　ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中，抗体分子发生变构，其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来，使C1q 可以将二者连接起来，从而造成假阳性。解决的办法是：①用EDTA稀释标本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加热血清使C1q灭活。
　　（3）嗜异性抗体
　　人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）Ig （s） 结合的天然嗜异性抗体，可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来，也能造成假阳性。解决的办法是：可在标本稀释液中加入过量的动物Ig （s） ，但加入量不足或亚类不同时无效。
　　（4）嗜靶抗原的自身抗体
　　抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶抗原结合形成复合物，在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现，解决的办法是：测定前需用理化方法将其解离后再测定。
　　（5）医源性诱导的抗鼠Ig （s） 抗体
　　临床开展的用鼠源性CD3等单克隆抗体治疗，用放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等新技术，均有可能使这些病人体内产生抗鼠抗体；另外，被鼠等啮齿类动物咬伤的病人体内也可以产生抗鼠Ig （s） 抗体。这些病人ELISA测定时均可产生假阳性。解决的办法是：测定抗原时，在标本中加入足量的正常鼠Ig （s） ，从而克服由于上述原因造成的假阳性。
　　（6）交叉反应物质
　　类AFP样物质等，是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大，但在用单克隆抗体测定抗原时，如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时，也会出现假阳性结果。
　?。?）标本中其它成分的影响 血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等，ELISA检测试剂盒均对ELISA测定结果有干扰作用。