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如何选择符合实验要求的核酸染料?

  • 发布日期:2022-05-27      浏览次数:704
    •   如何选择符合实验要求的核酸染料?
        核酸染料是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂,是生物实验中*的一分子,尤其是在核酸检测相关试验中,所以核酸染料对于分子生物学相关专业的学生来说并不陌生,该如何选择适合自己使用的核酸染料呢?以下从几个方面来说明:
        1、安全性:如果选择EB替代染料,那么染料的安全性就是一个非常重要的指标。安全性评估主要的检测有Ames测试、细胞渗透性实验、染色体畸变和正向突变分析、口服毒性分析等。在安全性方面,具有较多检测项目和机构出具检测报告的核酸染料,安全性可能会更高;另外在一些报道或对比数据中,我们也可根据它们可能的原料来判断它们的安全性。
        2、稳定性:核酸染料的稳定性和在各种条件下的染色效果,会直接影响观察到的染色结果。
        3、灵敏度:几乎所有的EB替代染料都其染料的灵敏度至少不低于EB,甚至高于EB,具体到试验内容上,只要不是有特殊的需求,一般都能满足。
        4、迁移率:由于核酸染料最终都会结合到DNA上,才能通过染料从而对DNA进行分析,这也就意味着如果采用点染法或胶染法进行核酸检测时,根据使用的染料不同,核酸染料或多或少会对核酸的迁移率甚至带型产生影响。
        7-AAD,是一种核酸染料,与DNA结合后可发出强烈的荧光,其荧光特性与PI相似,可被488nm氩离子激光激发,但其发射光谱较PI窄,且发射波长更长,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的*替代品,可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用,如FITC,PE等。
        另外,7-AAD是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合,可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞,广泛用于流式细胞仪。

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