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活体成像技术：
早在1999年由美国哈佛大学Weissleder博士*提出了分子影像学(molecular imaging，MI)的概念，即应用影像学的方法对活体状态下的生物过程进行细胞和分子水平的定性和定量研究。活体成像便是基于分子影像学孕育而生的，通过这个成像系统，可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移，感染性疾病的发展进程，特定基因的表达等生物学过程。
活体成像技术主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术。
★生物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA。
★荧光技术则采用荧光报告基团（GFP、RFP, Cyt及dyes等）进行标记。
★这一技术对肿瘤微小转移灶的检测灵敏度*，不涉及放射性物质和方法, 非常安全。操作极其简单、所得结果直观、灵敏度高。
活体成像两种检测技术介绍
活体成像 | 特点 | 优点 | 缺点 |
生物发光检测 bioluminescence | ★荧光素酶（Luciferase）对基因、细胞和活体动物进行标记； ★荧光素酶催化底物（例如荧光素钾盐）反应后，会产生化学发光。这种光是由化学反应而来，不需要激发光； ★标记方法是通过克隆技术，将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内，通过对克隆细胞进行筛选，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。 | ★特异性强，无自发荧光； ★高灵敏度，在体内可检测到几百个细胞，检测的深度在3-4cm； ★定量精确
| ★信号较弱，检测时间较长；★仪器精密度要求较高； ★细胞或基因需要转基因标记； ★不可用于人体，不适用于抗体、多肽等标记 |
荧光检测 fluorescence | ★采用荧光报告基因 (GFP、RFP等) 或荧光染料进行标记； ★需要外接激发光源，利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光，就可以形成体内的生物光源。 | ★荧光染料、蛋白标记能力强； ★信号强，成像速度快，操作简便，实验成本较低； ★未来可用于人； ★适用范围广，可以是动物、细胞、微生物，也可以是抗体、药物、纳米材料等。 | ★存在自发荧光，影响灵敏度； ★光容易被动物组织吸收； ★检测深度受限； ★背景光干扰，定量准确度低 |
★生物发光检测技术相关试剂和推荐品牌(以2020年价格为例比较)
荧光素酶及对应底物 | 底物产品品牌 （Goldbio） | 底物产品品牌 （Biotium） | 底物产品品牌（Bio-world） | 底物产品品牌（sigma） | |||||||||
萤火虫荧光素酶firefly luciferase/底物D-Luciferin （D-荧光素）
| D-Luciferin, Potassium Salt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin,Potassium Salt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin, Potassium Salt（D-荧光素钾盐） | D-Luciferin, Potassium Salt（D-荧光素钾盐） | |||||||||
LUCK-100mg | $54 | #10101/10mg | $60 | 40400076-1/50mg | $52.9 | 50227-1mg | $158 | ||||||
LUCK-500mg | $194 | #10101-1/50mg | $176 | 40400076-2/100mg | $90.05 | ||||||||
LUCK-1g | $254($199) | #10101-2/1G | $633 | 40400076-4/1g | $278.42 | 50227-1g | $1980 | ||||||
D-Luciferin, Sodium Salt（D-荧光素钠盐） | D-Luciferin,Sodium Salt(D-荧光素钠盐) | 无钠盐 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-荧光素钠盐） | ||||||||||
LUCNA-100mg | $54 | #10102/10mg | $70 | L6882-10mg | $252 | ||||||||
LUCNA-500mg | $194 | #10102-1/50mg | $186 | L6882-50mg | $1020 | ||||||||
LUCNA-1g | $254($199) | #10102-2/1G | $633 | L6882-100mg | $1880 | ||||||||
D-LuciferinFirefly,free acid （荧光虫荧光素游离酸） | D-Luciferin, Free Acid(D-荧光素游离酸)
| D-Luciferin Free Acid(D-荧光素游离酸)
| D-Luciferin | ||||||||||
L-123-500mg | $209 | #10100-1/50mg | $176 | 21530055-1/50mg | $465.33 | L9504/50mg | $1100 | ||||||
L-123-1g | $276 | #10100-2/1g | $633 | 21530055-1/100mg | $956.89 | L9504/100mg | $1940 | ||||||
海肾荧光素酶Renilla luciferase/ Coelenterazine（腔肠素） | Coelenterazine(天然腔肠荧光素) | Coelenterazine(天然腔肠荧光素) | 无 | Coelenterazine, native(天然腔肠荧光素) | |||||||||
CZ2.5mg | $60 | #10110/50ug | $60 | C2230-50ug | $152 | ||||||||
CZ5mg | $93 | #10110-2/250ug | $130 | ||||||||||
CZ25mg | $329 | #10110-1/1mg | $222 | ||||||||||
Coelenterazine 400 a | Coelenterazine 400a | 无 | |||||||||||
C-320-1mg | $73 | #10125/50ug | $62 | ||||||||||
C-320-10mg | $281 | #10125-2/250ug | $135 | ||||||||||
C-320-25mg | $585 | #10125-1/1mg | $233 | ||||||||||
★蚂蚁淘常年现货LUCK-1G |
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★活体技术荧光检测
荧光蛋白标记 | 适用于标记细胞、病毒、基因等，通常使用的是 GFP、EGFP、RFP（DsRed）等； | |
荧光染料标记 | 适用于标记抗体、多肽、小分子药物等；常用的有 Cy3、Cy5、Cy5.5 及 Cy7 | |
量子点标记（新的标记方法） | 适用于标记肿瘤，主要应用在活细胞实时动态荧光观察与成像； 量子点（quantum dot) 是一种能发射荧光的半导体纳米微晶体，外观恰似一极小的点状物。量子点荧光比有机荧光染料的发射光强的 20 倍，稳定性强 100 倍以上，具有荧光发光光谱较窄、量子产率高、不易漂白、激发光谱宽、颜色可调，并且光化学稳定性高，不易分解等诸多优点。 |